Le 14C influence-t-il une analyse par Mass Spec ?

Oui

Bonne réponse. Oui.

Evidemment que oui. Premièrement, parce qu’il s’agit de matériel radioactif et donc potentiellement dangereux. Et deuxièmement, car la masse atomique du 14C n’est pas la même que celle du 12C. Les résultats de Mass Spec dépendent de la masse des acides aminés… qui varie donc en fonction de leur composition atomique.

 

 

Non

Mauvaise réponse. Non.

Aïe. Si vous oubliez, c’est doublement grave : vos résultats seront probablement incorrects et vous mettrez en danger la vie des personnes qui vont effectuer la manipulation. Vers la bonne réponse.

 

 

Si nous avons tellement insisté sur les mesures de protections à adopter envers la radioactivité, ce n’est pas pour vous faire peur à ce sujet. N’oubliez pas qu’il y a beaucoup d’autres choses qui ne se voient pas et qui sont bien plus dangereuses (que les très faibles quantités de radioactivité que nous utilisons en laboratoire). Un des problèmes que vous rencontrerez le plus fréquemment dans votre carrière, est l’infection nosocomiale (infection acquise en milieu hospitalier). En passant de patient en patient, vous devenez le vecteur de germes pathogènes (tout comme les puces et les rats sont les vecteurs de la peste) ; il est donc important de vous désinfecter les mains avant et après avoir touché chaque patient; d’indiquer clairement les patients porteurs de pathogènes dangereux (MRSA, HCV, VIH) à vos collègues, qui réaliseront des analyses avec du matériel biologique (notamment sanguin) que vous aurez peut-être prélevé. Nous vous recommandons vivement la lecture de ce manuel.

 

 

Conclusion :

Durant ces deux expériences, vous avez découvert deux moyens de détecter des molécules. Une méthode peu spécifique, la coloration par le bromure d’ethidium (qui permet de détecter l’ADN et l’ARN), et une autre méthode à peine plus spécifique, le marquage radioactif des protéines (qui permet de marquer les protéines nouvellement synthétisées).

Question : Comment détecter spécifiquement une protéine ou un ADN, dont la séquence est connu, parmi d’autres protéines ou ADN, après séparation par électrophorèse ?

 

Vers la synthèse de l'expérience 2

 

Liens:
Voici toute une série de lien ciblant des sites extérieurs, sur lesquels vous trouverez des animations et des explications concernant l'électrophorèse. Ces liens ne sont là que pour vous aider à comprendre le sujet de ce TD (si tel n'était pas encore le cas). Tout ce que vous devez savoir sur l'électrophorèse a été présenté durant les synthèses.

http://www.tvdsb.on.ca/westmin/science/sbioac/genetics/Electro.htm
http://www.sumanasinc.com/webcontent/anisamples/majorsbiology/gelelectrophoresis.html
http://gslc.genetics.utah.edu/units/biotech/gel/
http://croptechnology.unl.edu/viewLesson.cgi?LessonID=1065724861
http://www.bio.davidson.edu/courses/genomics/method/SDSPAGE/SDSPAGE.html
http://www.ac-nancy-metz.fr/enseign/svt/eleve/prodelev/western/anim_west.htm
http://www.ac-creteil.fr/biotechnologies/main-biomol.htm
http://www.biochimie.univ-montp2.fr/deug/electro
http://www.snv.jussieu.fr/bmedia/lafont/electrophorese/E2.html
http://www.chimie-biochimie.umoncton.ca/bch/dg/siitub/siitubtdm.html

Et voici le lien donnant sur les illustrations montrées durant l'introduction :
Révision

 

B. Emery. 21.11.05